【生物反应器正确的灭菌步骤】北京霍尔斯发酵罐 -HOLVES

生物反应器

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生物反应器正确的灭菌步骤时间：2022.05.13

在进行生物反应实验之前，对生物反应器进行灭菌操作是必不可少的环节。灭菌操作不到位，很容易使生物反应器在运作过程中对发酵产品造成污染，导致较大的损失。因此，找对灭菌的技巧很重要，接下来一起浅论对生物反应器进行灭菌的步骤。

生物反应器的灭菌操作步骤

第一步：
取下生物反应器的搅拌电机，平放于桌上，电机接口处用锡箔纸包好并用皮筋捆扎，防止灭菌过程脱落，以消除高压蒸汽灭菌时产生的高温蒸汽对电机接口的破坏。

第二步：
由罐上取下温度传感器，温度传感器不直接接触发酵液，无需灭菌。

第三步：
安装pH电极：
• pH电极与面板之间有橡胶圈保护；
  • 务必拧紧电极的上下两个固定螺帽；
  • pH电极电缆接口处用锡箔纸包好并用皮筋捆扎，防止灭菌过程脱落，影响电极性能；
  • pH电极灭菌前要标定。

第四步：
安装DO电极：
• DO电极与面板之间有橡胶圈保护；
• 务必拧紧电极的上下两个固定螺帽；
• DO电极电缆接口处用锡箔纸包好并用皮筋捆扎，防止灭菌过程脱落，影响电极性能；
• DO电极灭菌完后标定；
• 灭菌前要注意溶氧电极里头的电解液是否还有，没有则要进行添加。

第五步：
取下消泡或液位电缆线，将消泡或液位电缆插到底，灭菌后定位到所需要的高度后就不要再压下去，消泡电极的高度离液面约1.5cm处。

第六步：
依次拆下生物反应器上冷却水进、出水管和冷凝器上的进、出水管，拆下的同时要用夹子夹住拆下水管的接头处，以防水流出。

第七步：
从鲁尔接头处取下空气管，并用软管夹将进气口硅胶管夹紧，硅胶管与空气过滤器跟随玻璃罐一起灭菌，尾气口同样用软管夹夹紧后将硅胶管与尾气过滤器一起放入灭菌锅。

第八步：
四通补料管口可用硅胶管堵住，亦可连接补料瓶一同灭菌（补料瓶一端连接呼吸阀），依据工况进行处理（若连同补料瓶一同灭菌，进料端必须使用软管夹夹紧）。

第九步：
收获管、备用管口分别使用软管夹夹紧面板端。

第十步：
灭菌前需调整好搅拌叶的位置，下部搅拌叶尽量安装在搅拌轴底部，上部搅拌叶调整到所加发酵液的中间位置。

第十一步：
在灭菌前，将生物反应器的六个固定螺帽拧紧。

第十二步：
• 灭菌前，火焰接种口一定要拧松，防止罐内外压强差太大炸罐；
• 通常高温高压灭菌121℃，20min（具体时间依培养基成分进行调整）；
• 灭菌结束后，发酵罐体可能温度高，请勿直接触碰，等设备冷却，并佩戴防护手套后再进行操作；
• 灭菌结束后，第一时间拧紧火焰接种口，防止染菌。

上述内容就是对生物反应器进行灭菌操作的具体步骤。再次强调：在使用生物反应器之前对其进行灭菌这一步骤至关重要，可以有效防范使用生物反应器时不受微生物污染。

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