如何正确把控发酵罐的接种量?
时间:2023.02.17
在微生物发酵中,因其分布广和体积小等特性,导致染菌的因素也多样。所以我们无法在实验中及时判断是否染菌,只有培养一段时间才能发现,最后也只能作废,十分影响实验进度及成本。因此,为了确保不会染菌和实验的顺利,在操作前也要按照规范进行无菌操作。除了之前对于发酵罐体的灭菌操作,在接种时更是要注意。
1. 发酵罐的接种量
首先需要注意把控接种量,适宜的接种量可帮助罐内的菌种繁殖,发酵产物快速生成,同时也可减少杂菌生长。但过大过小都会影响产物繁殖。
l 接种量过大时,由于发酵罐内的营养和氧气量是一定,而菌种过量,会很容易导致发酵罐内溶氧不足,还会有大量的代谢物,产物合成受到阻碍;
l 接种量过小时,发酵液中培养物不足,发酵时间推迟,发酵罐的生产效率大大降低
那么,究竟如何确定接种量呢?其实也就是将接种液体体积和之后的培养液体积。按照规定百分比确定即可。
首先需要注意把控接种量,适宜的接种量可帮助罐内的菌种繁殖,发酵产物快速生成,同时也可减少杂菌生长。但过大过小都会影响产物繁殖。
l 接种量过大时,由于发酵罐内的营养和氧气量是一定,而菌种过量,会很容易导致发酵罐内溶氧不足,还会有大量的代谢物,产物合成受到阻碍;
l 接种量过小时,发酵液中培养物不足,发酵时间推迟,发酵罐的生产效率大大降低
那么,究竟如何确定接种量呢?其实也就是将接种液体体积和之后的培养液体积。按照规定百分比确定即可。
2.发酵罐的接种方式
其次就是接种的方法。对于大型的工业化生产通常是采用发酵罐的压力差来进行接种。而对于小型发酵罐则是采用另外两种方式进行接种:火焰接种和注射器接种。
注射器接种
步骤1 将接种口和周围用酒精棉进行消毒,操作者双手也要消毒
步骤2 调节发酵罐罐压(具体操作见下篇)
步骤3 准备好无菌的注射器(提前在超净台吸入菌种液体),无菌操作将种子液安全注入发酵罐内。
此种接种方式可以避免菌种与外界空气接触,避免了明火使用,适用于5L以下的小型发酵罐。
今天先带大家了解其中一种接种方式,继续关注霍尔斯(HOLVES),下篇接着讲述。